微生物🦠小实验
灵溪镇第二小学 四年二班 谢钰淇
前 言
食品安全一直是人们关注的热点话题之一。食品微生物是指存在于食品中的微小生物，包括细菌、真菌、酵母菌等。它们可以对食品的品质和安全性产生重要影响。
此次实验，我将在食品检测人员帮助下完成对蛋糕的食品微生物检测和文字编辑。
实验方向
- 食品微生物检测：虎皮蛋糕
- 菌落总数 ：衡量食品被细菌污染的程度。
- 大肠菌群计数：指示视频中是否存在肠道致病菌。
- 霉菌：检测食品中是否存在霉菌，以评估食品的保存状态和质量。
注：此实验均在实验人员指导帮助下完成，实验结果不做数据计算，仅用观察不同温度环境下食品细菌的生长的情况
目 录
一、实验设计🧪
二、实验准备
三、微生物实验
四、实验结果
五、感想体会
一、实验设计🧪
将同一天生产的三个虎皮蛋糕（样①、样②、样③）分别存放在不同的温度环境下，进行微生物检测。
注：表格中的保存方法是指包装上要求的储存方法
二、实验准备
实验相关设备、材料、培养基和试剂
1、实验样品、剪刀、帽子、无菌手套、口罩
2、生化培养箱、冰箱、恒温水浴锅、显微镜、移液枪、移液吸头、酒精灯、无水乙醇、无菌广口瓶
3、无菌生理盐水、结晶紫中性红胆盐琼脂、平板计数琼脂、孟加拉红琼脂、9ml无菌生理盐水
三、微生物实验
注意：食品微生物需要在无菌室和超净工作台进行
样品①实验时间：2024/08/06 15:00
1、戴好口罩、帽子、鞋套、进入无菌室，换好实验服，戴好无菌手套，点燃酒精灯。
2、从冷藏室取出样品①，对外包装进行消毒（使用75%乙醇消毒液净泡过的棉花）。
3、称取25g样品置于盛有225ml无菌生理盐水的无菌广口瓶内，制成1:10的样品匀液，摇匀。
4、用移液器吸取1:10样品匀液1ml到无菌培养皿（菌落、大肠、霉菌各两个），同时，分别吸取1ml无菌生理盐水至无菌培养皿做空白对照（菌落、大肠、霉菌各两个）
5、将15～20ml冷却至46°C～50°C的培养基分别倾注培养皿（平板计数琼脂、结晶紫中性胆盐琼脂、孟加拉红琼脂），并转动培养皿使其混合均匀（其中结晶紫中性胆盐琼脂凝固后，再加3ml-4ml覆盖平板表层）。
6、水平放置待琼脂凝固后
- 菌落总数（平板计数琼脂）：将平板翻转，置于36°C培养箱培养48h。
- 大肠菌群（结晶紫中性红胆盐琼脂）：将平板翻转，置于36°C培养箱培养24h
- 霉菌（孟加拉红琼脂）：正置平板，置28°C培养箱中培养，观察并记录培养至第5天的结果。
注：1⃣️微生物实验中的空白对照是为验证实验过程是否受到污染，确保实验结果的可靠性。
2⃣️为了方便识别，分别给它们做了标记，用字母代替
菌落总数：J 大肠菌群：D 霉菌：M
四、实验结果
2024/08/07 14:00
样品①大肠菌群实验结果：
- 计数平板上未出现典型和可疑大肠菌群菌落
- 空白对照平板正常
掌握知识：大肠菌群典型菌落为紫红色，菌落周围有红色胆盐沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大。
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2024/08/07 15:00
对样品②、样品③进行检验
1.样品情况：样品②在常温环境放置24h
样品③在冷藏3.3°C环境下放置24h
2. 样品②在实验过程中，对菌落总数测定进行了10倍、100倍、1000倍稀释（将制好的1:10的样品匀液，取1ml，沿管壁缓慢注入盛有9ml无菌生理盐水试管中，振荡混匀，制成1:100的样品匀液，再从1:100的样品匀液中取1ml至新的9ml无菌生理盐水试管中，振荡混匀，制成1:1000样品匀液），制备匀液过程中分别取各自制好的样品匀液1ml到培养皿，加入琼脂，放置培养箱培养。
3.霉菌和大肠菌群按样①实验步骤
注：1:10样品匀液 标注为-1
1:100样品匀液 标注为-2
1:1000样品匀液标注为-3
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2024/08/08 14:00
样品②、③大肠菌群实验结果：
- 计数平板上均未出现典型和可疑大肠菌群菌落
- 空白对照平板正常
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2024/08/08 15:20
样品①菌落总数实验结果：
我发现样品①所在的琼脂上长了大大小小不同的白色菌落，实验人员告诉我，这些菌落可以是细菌、真菌或其它微生物的聚集。
⭕️ 经过和实验人员的探讨，我发现如果是要求冷藏的食品，即使是在保质期内，夏天在常温的环境中放置了几个小时，没有马上食用，一般情况会有菌类繁殖。
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2024/08/09 15:00
样品②菌落总数结果：
1、我发现样品②平板计数琼脂上长满的密密麻麻的菌落，稀释到-2（100倍），-3（1000倍）还是数不清。
2、样品③菌落总数结果：
平板计数琼脂上只有个别菌落
⭕️ 根据样品②、样品③的实验结果我发现样品②从冷藏拿到常温的环境下，放置了24小时，即使在保质期内，也长满了菌。而样品③从一起采购到家里（中间路程花了30分钟），放在冰箱冷藏直到和样品②同一时间做实验，它的菌落生长情况是最干净的。
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2024/08/11 15:30
样品①培养5天后，可以清楚的看到霉菌，上面有明显的菌丝。
2024/08/12 15:30
样品②霉菌生长更多，并有其它形态菌落。
样品③无霉菌生长。
我的实验总结：我通过对三种菌的不同保存方法的实验观察，发现没有添加防腐剂的食品必须按照生产食用要求贮存，并且在保质期内食用。样品①和样品③虽然都存放于冷藏柜，但是样品①取出没有立即食用，即使相差几小时也会造成不一样的影响。
知识驿站
革兰氏染色：
为了让我能了解更多菌种，观察到细菌在显微镜下的形状，我在实验人员的帮助下观察到了金黄色葡萄球菌在显微镜下的形态。
1、金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物，属于葡萄球菌属，是革兰氏阳性菌的代表。它广泛存在于自然界中，包括人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃等部位，以及空气、污水等环境中。金黄色葡萄球菌的最适宜生长温度为37℃。
2、典型的金葡菌为球型，菌体较小，直径为0.8μm左右。显微镜下排列成葡萄状，大小一致，革兰染色阳性，衰老或死亡后可转为阴性。
五、感想体会
一、通过这次自己动手检验观察食品微生物，我更加深刻地认识到了食品安全的重要性。微生物污染是导致食品安全问题的主要原因之一。如果食品中的微生物数量超标或存在有害微生物，就会对人体健康造成严重的威胁。同时，我也意识到作为消费者，我们都有责任和义务去关注食品安全问题、维护自己的健康权益。