每年的10月到次年的4月为流感高发季节,抚顺市疾病预防控制中心根据医院采集标本中流感阳性样本进行流感病毒鸡胚分离实验,所得毒株上送至辽宁省疾病预防控制中心。
流感病毒属正黏病毒科在鸡胚羊膜腔及尿囊腔中均生长良好,故常应用羊膜腔、尿囊腔各接种200微升病毒液。鸡胚分离病毒是一种经典的病毒分离方法。
种蛋由养鸡场提供,实验人员将检卵正常的种蛋,置37℃孵箱内孵育9-11d,每天检卵1次。将9-11d胚龄的鸡胚进行消毒,用镊子打开气室卵壳直径1.5cm的圆孔,滴加1~3滴无菌液体石蜡,使卵膜透明,清晰可见鸡胚结构,在鸡胚头与足之间进针,将准备好的流感病毒液直接接种在羊膜腔、尿囊腔。然后用无菌的涂有蛋清的塑料膜封盖严密,直立于33~35℃孵箱内甲型流感病毒孵育48h、乙型流感病毒孵育72h,打开塑料薄膜收集羊水、尿囊液。收集的羊水、尿囊液作流感病毒血凝试验检测和血凝抑制试验。未试验成功的样本进行二代接种。
从2023年10月截止到2024年3月4日,流感病毒鸡胚分离试验共培养出13株毒株并送检至辽宁省疾病预防控制中心。